Une micropipette transfère un volume de liquide mesuré, généralement entre 0,5 µl et 5 ml, et la bonne est celle dont la plage encadre le volume que vous dispensez réellement. Choisissez d'abord la plage de volume, puis le modèle à volume fixe ou variable, puis la distribution unitaire ou répétée, et enfin qui la vérifiera et comment. Ce guide parcourt ces quatre choix à l'aide des gammes Globe Scientific Diamond, Diamond Pro, Diamond Jr. et RV-Pette qu'ERE répertorie.
Dans ce guide
- Quelle plage de micropipette vous faut-il ?
- Faut-il choisir un pipetteur à volume fixe ou à volume variable ?
- Que proposent les gammes Diamond, Diamond Pro, Diamond Jr. et RV-Pette ?
- Quand une pipette de transfert ou une pompe à pipette est-elle plus appropriée ?
- Comment une pipette est-elle étalonnée et vérifiée ?
- Comment choisir une pipette, étape par étape ?
- Foire aux questions
Quelle plage de micropipette vous faut-il ?
Choisissez la plus petite plage dont la limite supérieure est égale ou supérieure à votre volume cible, car une pipette n'est spécifiée qu'à l'intérieur de sa plage. Une distribution de 15 µl revient à une pipette de 2–20 µl, et non à une pipette de 10–100 µl, où 15 µl se situe près du bas de l'étendue. Le tableau associe les volumes de travail courants aux plages variables des pipetteurs Diamond et du Diamond Pro offerts par ERE.
| Volume dispensé | Plage variable à choisir | N° de pièce Diamond | N° de pièce Diamond Pro |
|---|---|---|---|
| Jusqu'à 10 µl | 0,5–10 µl | GS-3301-10 | GS-3311-10 |
| Plus de 10, jusqu'à 20 µl | 2–20 µl | GS-3301-20 | GS-3311-20 |
| Plus de 20, jusqu'à 50 µl | 5–50 µl | GS-3301-50 | GS-3311-50 |
| Plus de 50, jusqu'à 100 µl | 10–100 µl | GS-3301-100 | GS-3311-100 |
| Plus de 100, jusqu'à 200 µl | 20–200 µl | GS-3301-200 | GS-3311-200 |
| Plus de 200 µl, jusqu'à 1 ml | 100–1000 µl | GS-3301-1000 | GS-3311-1000 |
| Plus de 1 ml, jusqu'à 5 ml | 1000–5000 µl | GS-3301-5000 | GS-3311-5000 |
La plupart des paillasses finissent par compter trois ou quatre plages plutôt qu'une seule. Si votre protocole va de 5 µl à 900 µl, ce sont généralement les pipettes de 5–50, 20–200 et 100–1000 µl qui se partagent le travail.
Faut-il choisir un pipetteur à volume fixe ou à volume variable ?
Choisissez le volume fixe lorsqu'un seul volume est dispensé toute la journée, et le volume variable lorsque le volume change d'une méthode à l'autre. Un pipetteur à volume fixe n'a rien à régler et ne peut donc pas être réglé au mauvais volume. La gamme Diamond répertorie des volumes fixes de 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50, 100, 200, 300, 500 µl et de 1, 2, 3 et 5 ml (pièces GS-3302-5 à GS-3302-5000). La gamme Diamond Pro répertorie un ensemble fixe plus court (GS-3312-5 à GS-3312-5000).
Les pipetteurs à volume variable trouvent leur place là où plusieurs méthodes se partagent une paillasse. La fiche Diamond mentionne un piston à deux positions qui permet le pipetage direct et le pipetage inverse selon le liquide. Le pipetage direct est la technique habituelle pour les échantillons aqueux; le pipetage inverse est la technique usuelle pour les liquides visqueux ou moussants.
Que proposent les gammes Diamond, Diamond Pro, Diamond Jr. et RV-Pette ?
Chaque gamme répond à un travail différent. Voici comment les fiches ERE les distinguent.
- Pipetteurs Diamond : la gamme polyvalente. La fiche mentionne un cône d'embout et une section inférieure autoclavables, un éjecteur d'embout profilé pour les tubes à col étroit, un code de couleur par plage, un certificat d'étalonnage, une trousse d'outils de réétalonnage et une garantie d'un an. L'étalonnage est effectué dans une installation ISO 17025.
- Diamond Pro : les mêmes caractéristiques avec une prise en élastomère souple. La fiche indique que le rembourrage réduit la tension au pouce et limite le transfert de chaleur corporelle à la pipette, ce qui convient aux longues séances de pipetage.
- Pipetteurs Diamond Jr. : à volume fixe, moitié moins grands qu'un pipetteur standard, répertoriés à 5, 10, 20, 25, 35, 50 et 100 µl.
- Pipetteur à volume répété RV-Pette : remplit un embout jetable une seule fois et dispense plusieurs fois. La fiche répertorie 29 volumes entre 1 µl et 5000 µl, jusqu'à 48 distributions par remplissage et des intervalles aussi courts qu'une seconde. Il s'utilise avec les embouts-seringues distributeurs Globe.
Pour le travail en plaques, le dispositif de pipetage Vaccu-Pette/96 est un dispositif stérile et jetable à 96 canaux qui aspire ou dispense tous les puits en moins de dix secondes lorsqu'il est raccordé à une seringue de 30 ml ou plus. Les fiches d'ERE ne répertorient actuellement aucune micropipette électronique ni micropipette multicanaux à volume variable; si vous en avez besoin d'une, indiquez le nombre de canaux et la plage de volume dans votre demande de soumission.
La gamme complète figure dans la collection de pipetteurs.
Quand une pipette de transfert ou une pompe à pipette est-elle plus appropriée ?
Utilisez une pipette de transfert pour déplacer du liquide de l'ordre du millilitre lorsque la justesse n'est pas l'objectif, et une pompe à pipette pour remplir des pipettes volumétriques en verre ou en plastique. Une pipette de transfert sert à déplacer un échantillon, non à le mesurer. Les pipettes de transfert à usage général sont en polyéthylène flexible, répertoriées à 3, 5 et 7 ml avec des graduations de 1 à 3 ml : elles indiquent un volume plutôt qu'elles ne le garantissent.
Les pompes à pipette remplissent les pipettes graduées. La pompe à pipette Fast Release II est répertoriée à 2, 10 et 25 ml. Sa fiche décrit un fonctionnement à une main avec des pipettes en verre ou en plastique, une molette pour aspirer le liquide jusqu'au volume voulu et un levier à dégagement rapide pour vider. Pour les transferts plus importants, les pipettes géantes SteriWare commencent à 80 ml.
Comment une pipette est-elle étalonnée et vérifiée ?
La méthode de référence est gravimétrique : on pèse l'eau délivrée par la pipette et on convertit la masse en volume. La norme ISO 8655-6:2022 est la procédure de référence gravimétrique pour les pipettes à piston, et la balance utilisée doit respecter des exigences minimales qui dépendent du volume nominal, selon un résumé de la norme par Mettler Toledo (en anglais). Le NIST décrit le même principe gravimétrique dans Selected Procedures for Volumetric Calibrations (NISTIR 7383) (en anglais) et publie ses procédures de mesure par l'entremise du Office of Weights and Measures du NIST (en anglais).
L'exigence relative à la balance est ce qui rend coûteuse la vérification des pipettes de petit volume. D'après les chiffres de ce résumé :
| Volume nominal (haut de la plage) | Résolution de balance requise | Plages Diamond concernées |
|---|---|---|
| 0,5 µl à moins de 20 µl | 0,001 mg (monocanal) | 0,5–10 µl, plus volumes fixes de 5, 10 et 15 µl |
| 20 µl à moins de 200 µl | 0,01 mg | 2–20, 5–50 et 10–100 µl, plus volumes fixes de 20 à 100 µl |
| 200 µl à 10 ml | 0,1 mg | 20–200, 100–1000 et 1000–5000 µl, plus volumes fixes de 200 µl à 5 ml |
Le même résumé précise que l'étalonnage des pipettes est généralement confié à un fournisseur de services spécialisé, ce qui explique pourquoi de nombreux laboratoires envoient les plus petites pipettes à l'extérieur et vérifient les plus grandes sur une balance de paillasse. Notre guide des balances de laboratoire explique en détail les classes de lisibilité. Le résumé indique aussi que les méthodes d'étalonnage de l'ISO 8655 exigent au moins 10 mesures répétées par volume testé et que la balance elle-même doit faire l'objet d'un programme d'étalonnage.
Les fiches Diamond et Diamond Pro indiquent que chaque pipetteur est livré avec un certificat d'étalonnage, une trousse d'outils de réétalonnage et une garantie d'un an, et que l'étalonnage est effectué dans une installation ISO 17025. La fréquence de revérification relève de votre système qualité; le résumé du fournisseur cité ci-dessus évoque un étalonnage d'une à quatre fois par année, avec des vérifications de routine entre-temps, et c'est votre procédure normalisée qui fixe l'intervalle réel.
Les laboratoires qui utilisent déjà une centrifugeuse, un mélangeur ou un agitateur sur la même paillasse peuvent compléter ce guide avec nos guides sur la centrifugeuse de laboratoire et le mélangeur vortex.
Comment choisir une pipette, étape par étape ?
- Notez les volumes que vous dispensez, le plus petit et le plus grand, pour chaque méthode.
- Associez chaque volume à la plus petite plage qui le contient à l'aide du tableau ci-dessus.
- Décidez entre volume fixe et volume variable : un seul volume répété convient au volume fixe; des volumes changeants conviennent au volume variable.
- Vérifiez la distribution répétée : si vous dispensez le même volume 20 fois ou plus à partir d'une même source, examinez le RV-Pette.
- Planifiez la vérification : décidez qui étalonne, à quelle fréquence, et si vous possédez une balance assez fine pour la plus petite plage.
- Confirmez les embouts et accessoires au moment de la soumission, car les embouts sont un article récurrent.
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Foire aux questions
Quelle est la différence entre une pipette et une micropipette ?
Une pipette est tout outil qui transfère du liquide; une micropipette est une pipette à piston pour des volumes de l'ordre du microlitre. ERE répertorie des micropipettes sous forme de pipetteurs à volume variable et à volume fixe de 0,5 µl jusqu'à 5000 µl.
Comment choisir la bonne plage de volume de micropipette ?
Choisissez la plus petite plage dont la limite supérieure est égale ou supérieure à votre volume cible. Par exemple, 15 µl revient à une pipette de 2–20 µl plutôt qu'à une pipette de 10–100 µl.
Faut-il acheter des pipetteurs à volume fixe ou variable ?
Le volume fixe convient à un seul volume répété, car rien ne peut être mal réglé; le volume variable convient à des méthodes changeantes. Les deux sont offerts dans la gamme Diamond.
Comment les pipettes sont-elles étalonnées ?
Par la méthode gravimétrique de l'ISO 8655-6 : l'eau délivrée par la pipette est pesée puis convertie en volume. Pour les pipettes de volume nominal inférieur à 20 µl, la balance doit lire au 0,001 mg, ce qui explique pourquoi les petites pipettes sont souvent étalonnées par un fournisseur de services.
ERE vend-elle des pipettes multicanaux ou électroniques ?
Les fiches d'ERE répertorient actuellement des pipetteurs monocanaux, le pipetteur à volume répété RV-Pette et le dispositif pour plaques Vaccu-Pette/96, mais aucune micropipette électronique ni multicanaux à volume variable. Envoyez-nous votre besoin au moyen du formulaire de soumission.
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Read in English: Micropipette Guide: Choose by Volume Range, Fixed vs Adjustable and Calibration for Canadian Labs